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原位干细胞培植皮肤再生技术及大面积深度烧伤
皮肤再生的微观变化
皮肤再生后的微观变化也与传统疗法的结果有本质的差异。以深II度为例 ，几乎所有教科书上都讲 ，深II度烧伤一定是瘢痕愈合。我们的烧伤科技分中心的研究结果证明了MEBT/MEBO治疗的深II度创面的微观变化特点。为了科学的表达这一结果 ，我们用组织切片要领 ，跟踪深II度创面愈合的全过程。从组织病理切片的光镜和电镜视察中发现了许多奇观。组织细胞的损伤特点是皮肤结构破坏 ，真皮层泛起空泡坏死 ，发生瘀血改变。电镜下的体现也说明了这一点 ，如真皮层细胞发生坏死、血流瘀滞、真皮血管发生栓塞等 ，是典型的深II度烧伤特点。然而 ，经过MEBT/MEBO治疗3天后 ，坏死的固体组织酿成了液体组织 ，即标志液化排除过程开始。治疗5天 ，大范围液化开始了 ，由表入里层层液化。但此时这些组织仍处在坏死阶段。治疗10天 ，液化基本结束 ，同时修复开始 ，界限相当清楚。一切组织都在膜下生长 ，这就是再生过程开始。由于再生细胞的形成并不是同时完成的 ，所以细胞及细胞内部变化并不均匀 ，只是一个细胞群。而细胞群并不是一天形成的；干细胞群泛起 ，直至最后形成皮肤。这个现象我们早在1988和1989年发现了。其时将这种增生活跃细胞称之为再生细胞 ，其实就是干细胞。因此说干细胞是原来就存在的 ，它就是一堆增殖破裂、分化能力比力活跃的细胞。干细胞的演变过程是从少到多 ，即形成一个胚胎样结构 ，再转为从多到少 ，皮肤创面愈合后则消失。
成纤维细胞合成活跃 ，它能为干细胞提供良好的物质。成纤维细胞能生成胶原纤维 ，只要维持它的连续功效 ，就能不停地为干细胞提供细胞外间质重要身分之一胶原卵白。因为深II度烧伤脂肪组织健存 ，用MEBO处置的创面成纤维细胞内的纤维束相当整齐 ，电镜下视察如同头发丝一样。但是用磺胺嘧啶银治疗的创面 ，则不会泛起上述结果 ，一定是瘢痕愈合。我们正在研究纤维干细胞修复。纤维干细胞能发生许多生长因子 ，调控组织修复。如纤维细胞数量增加 ，生长因子也增多 ，便抑制上皮生长因子 ，使生长因子比例失调。反之亦然。因此 ，它们之间必须保持一定的平衡 ，这就是再生修复的规律。成熟组织细胞一旦形成 ，就失去干细胞特性。这个深II度创面最终在22天愈合 ，完成了皮肤真皮和表皮完美的生理性再生 ，这才是真正的深II度创面愈合的组织体现特点。
干细胞的追踪表达研究
干细胞的追踪表达研究的目的是确认干细胞的存在。凭据细胞周期的变化规律 ，有些细胞可恒久处在G0期或G1期 ，只有在一定条件下才泛起增殖活动；但有些细胞可连续进行破裂活动。破裂后的部门子细胞可分化为执行一定功效的成熟细胞；另外一些子细胞则保持连续破裂、增殖的能力 ，此即为干细胞。正常皮肤表皮基底层干细胞可不停地进行破裂 ，新生的细胞向上方移动 ，在到达棘层深部时 ，可再破裂2~3次 ，尔后失去破裂能力。由此可见 ，皮肤浅II度烧伤干细胞是显而易见、容易确认的。但是在III度烧伤创面上 ，表皮干细胞已破坏殆尽。但是 ，由于III度创面深层存在有脂肪及纤维隔组织 ，它可以提供干细胞来源 ，或者说干细胞是在创面局部四周存在的。我们接纳免疫细胞化学要领在烧伤创面上寻找和印证干细胞。因为再生的表皮干细胞能合成特有的19型角卵白 ，用抗人角卵白19型单克隆抗体 ，用生物素-抗生物素卵白DCS体系间接免疫荧光技术 ，能够准确、特异地测定出深II度和浅III度烧伤皮肤残存皮下组织再生的表皮干细胞。但应指出 ，当标本取下后不能使细胞发生传代改变 ，如果细胞发生传代改变 ，那就不是干细胞了 ，而酿成了其它细胞。所以 ，我曾在1997年的学术陈诉中强调 ，一定要设计原位 ，如果一旦发生传代 ，就不能再表达创面的真实病理变化。角卵白19型单克隆抗体免疫荧光试验呈阳性反映细胞在烧伤创面上数量较多泛起 ，而正常皮肤可见少量阳性反映细胞。同时发现 ，细胞的再生启动是在两小时后 ，而不是以往所说的3天后才开始发生再生反映。因为两小时后渗出已开始 ，细胞可从中获得生物素 ，并开始破裂。第4天 ，几乎所有湿性疗法创面组织里都有干细胞 ，而且是原始的干细胞。第7天干细胞仍然很多 ，说明液化和细胞生长的岑岭期已经开始；14天达最岑岭。III度烧伤在27~28天的时候 ，真皮层几乎已修复完整 ，但表皮尚未愈合。当皮肤一旦修复 ，角卵白19型阳性细胞的数量又恢复到正常皮肤的水平了。这就是前边所述的 ，干细胞的生长规律是一个从少到多 ，再从多到少的过程。由于MEBT/MEBO的治疗作用 ，激活了休眠状态的潜在干细胞的再生 ，从而有力的保证了深II度和浅III度烧伤能实现无瘢痕愈合和自然修复。
我们的研究还发现 ，骨组织里面能长皮下组织和皮肤组织 ，将烧伤骨的外貌进行钻孔 ，当肉芽形成时会有表皮细胞生长 ，并能实现愈合。因为骨髓中有造血干细胞 ，而且是多功效干细胞。
大面积深度烧伤的系统治疗
烧伤是一种全身性疾病 ，尤其是大面积烧伤。烧伤治疗 ，不能仅从创面局部考虑 ，要从整体论上去考虑疾病的治疗问题, 即局部与全身治疗不能支解。在MEBT/MEBO作用下 ，可以实现创面生理性愈合 ，如何实现 ，系统治疗就是保障。没有这个保障 ，不行能取得良好的治疗效果。之所有强调系统治疗 ，还因为我们的局部治疗要领改变了 ，即不是过去西方传统的外科治疗模式 ，而是烧伤湿性医疗技术 ，它不是以外科手术为主的治疗要领。鉴于这种情况 ，必须对全身系统治疗加以调整 ，进行统一 ，或者说要有一个治疗方案。但是 ，这个方案并非是适应于所有病人的 ，因为病人之间差异很大 ，我们主张治疗方案个体化 ，或者说这个方案是建议性的。但是 ，在整个治疗过程中所接纳的一切治疗措施都要围绕一个原则 ，即是不增加第二次创伤和不造成第二次攻击的治疗方案 ，维护生命的整体规律。不仅是局部 ，对全身也是如此 ，如不增加心、肾、脑负担 ，�；じ卧喙πУ�。
（一）早期救治问题
这是烧伤治疗的第一关。凭据上述原则 ，不给病人造成二次创伤攻击 ，除差池创面的攻击外 ，还包罗对精神因素的�；�。精神因素分主、客观两方面。烧伤后病人恐惧感加重 ，脑垂体要排泄、释放许多激素类物质 ，可能在短时间内全部释放出来 ，这是病人的自我�；ば苑从�。但在烧伤那一霎那痛觉发生 ，烧伤疼痛与创面直接袒露于空气中有关 ，这个发病过程影响烧伤全病程。当情绪稳定后 ，大面积烧伤病人反抗力低下 ，这是个规律。面对这一规律 ，首要的是稳定病人情绪。今后进入第二阶段 ，病人从一个情绪最激昂状态一下落到最低状态 ，但早期应激状态下的代谢产物 ，要在此阶段发生病理生理反映。所以说烧伤病人的全身功效状态一旦脱离现场 ，即进入低潮阶段 ，而且逐步降低。伤后两小时之内的变化为内排泄性的、攻击性的；2小时之后的改变与血容量下降有关 ，心肌缺血 ，体液重新分配。因此要加强心、肾等脏器的�；� ，注意病人接纳合适的体位 ，宜取平卧位 ，但不取头低位 ，也不宜搬动病人。其次 ，早期救助要注意保温。因为病人体温调治功效低下 ，水分蒸发量增加 ，热量大量丧失 ，自我保温功效降低。往往病人感受越冷、体温则越高；感受不冷身体也不发烧。因此 ，早期救助要通过外界环境予以增补。再次是创面处置 ，如果现场无法处置可不予处置 ，但能处置者一定不要给予二次攻击 ，可用MEBO�；ご疵� ，或简单包扎起来后送医院实行MEBI/MEBT治疗。
（二）治疗问题
病人入院后不进行彻底清创处置 ，而用极悦开户平台（MEBO）清创术 ，即不是用水冲洗 ，而是以药刀相结合而到达创面清洁的要领。这种清创术可在病房内进行。极悦开户平台可止痛 ，可以去除余热 ，利于已坏死组织液化等。
在强心、保肾措施的同时 ，要注意视察尿量 ，因为它对补液措施的制定有重要参考价值。
关于休克期补液量问题 ，因为我们接纳的是湿性医疗技术 ，在局部处置要领上与西方传统医学截然差异 ，因此不能机械地执行他们的补液公式。凭据我们10多年的临床实践得出的经验公式为：
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每日液体入量(ml) =
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每日生理需水量（2000~2500 ml）+ % TBSA烧伤面积×1.0（ml）×kg体重
ml每小时尿量 / kg（体重）
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以上公式适用于伤后48 ( 72小时之内 ，主要调整指标是尿量。只要保证每小时每公斤体重尿量不少于1ml ，岂论成人还是小儿 ，此公式皆宜。虽然 ，每个医院都有自己的治疗经验 ，此公式仅是一个经验公式 ，应凭据病人的具体情况确定输入液体的种类及总量 ，同时应对休克原因进行分析 ，据情做相应处置。
除抗休克之外 ，另一个重要问题是抗熏染治疗�？寡局瘟频脑蚴瞧揪萆丈撕笙妇谋浠媛啥贫ǖ�。因为烧伤后早期（7天内） ，全身因创伤应激反映处于亢进状态。在这7天内 ，应当说全身几乎动用了所有的力量来搪塞严重的应激状态。这7天的变化可归纳为三波：创伤波、休克波、代谢波。由于三波的存在 ，这7天内机体的变化是重复无常的 ，体内没有更多的能量及抗病能力 ，体现最突出的一点就是免疫功效下降。此时要用高效、广谱、足量抗菌药物 ，其目的之一是预防性应用 ，辅助机体渡过难关�？咕┪锼溆幸欢ǜ弊饔� ，但此时应用常不明显。7天后 ，机体合成代谢加强 ，主要体现在脏器功效和创面愈合方面。如肝脏 ，由于肝细胞修复能力很强 ，经过早期作用之后 ，肝细胞功效很快恢复 ，卵白合成速度增加 ，抗熏染能力加强。在创面修复方面 ，干细胞的代谢需要卵白质 ，要破裂、增殖 ，若再使用大量高效广谱抗菌药物 ，会抑制细胞合成。故从全局角度考虑 ，5(7天后建议停用抗菌药物。虽然 ，7天后可能还会发生熏染 ，但熏染原因来自肠道的可能性很小 ，多数情况为创面熏染 ，因为此时肠粘膜功效已基本恢复。所以我们应经常检查创面是否存在病灶 ，一旦发现熏染灶 ，立即清除。一般认为 ，休克过程中存在有肠源性熏染的倾向 ，因为肠粘膜总有损害 ，故有熏染的危险。但休克期发生的熏染不易辨认。对全身性熏染的识别 ，主要通过视察呼吸、心跳、体温的变化 ，把这三方面的症状结合起来分析 ，简称为三联征 ，而且需要一个一个的识别 ，一个一个的排除。细菌学检查很有须要 ，但往往来不及进行 ，此时要看周围血象中白细胞的中毒颗粒。因为它与菌血症、毒血症有关。菌血症时常泛起吞噬细胞变化 ，而不泛起中毒颗粒；毒血症中毒颗粒明显增加 ，此时可接纳一次性大剂量抗生素处置 ，并应寻找熏染源。关于抗熏染治疗 ，我们仍强调并非把细菌杀死才是抗熏染 ，MEBO自己具有改变细菌形态和降低细菌毒力的能力 ，这反抗熏染来说应视为与抗生素同等重要。
营养支持疗法也是全身系统治疗的一个重要组成部门 ，以肠道营养为主是我们多年的治疗经验 ，但何时实行口服营养 ，或是接受静脉营养治疗 ，应视病情而定。
今年是卫生部十年百项医药卫生技术推广普及的最后一年 ，在卫生部的鼎力支持和我们的努力下 ，这一创新技术已成为国内烧伤治疗的通例技术 ，并已主导本世纪世界烧伤及创面愈合的新潮水。